新品上市|破骨细胞形成的开关级信号分子——RANKL全新上市！

1.破骨细胞诱导培养

由于破骨细胞在体内数量稀少，体外分离培养较为困难，因此通常采用诱导法。将RANKL与巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）联合使用，能够高效诱导源自骨髓、外周血或细胞系的单核/巨噬前体细胞分化为成熟破骨细胞。

2.调控免疫细胞功能

• T细胞和树突状细胞激活：在特定共刺激信号的作用下，RANKL能够促进T细胞的活化和增殖，同时增强树突状细胞的存活，提升其刺激初始T细胞的能力。

• 免疫模型构建：RANKL在免疫细胞间相互作用的研究中具有重要应用，尤其是在探索自身免疫疾病、移植免疫和肿瘤免疫微环境中的RANKL/RANK信号通路的作用。

3.其他疾病相关研究

• 肿瘤研究：在某些癌细胞（如乳腺癌、前列腺癌）培养中，RANKL信号可能促进其迁移、侵袭或生存，可用于模拟癌细胞骨转移前的“预适应”研究。

• 器官型共培养：在复杂的共培养体系（如骨-免疫、骨-肿瘤共培养）中，添加RANKL是精确调控破骨端功能、模拟体内微环境的关键手段。

• 高生物活性

通过Raw246.7细胞分化实验测定该效应的ED₅₀<600 ng/mL。

• 高纯度

纯度高于95%，杂质蛋白干扰极低

• 低内毒素

适合敏感原代细胞

• 批间一致性

适用于长期课题与药筛体系

• 适配多种细胞模型

RAW264.7、BMM、PBMC等均适用

实验细胞：Raw264.7

实验体系：①完全培养基：DMEM+10%FBS+1%PS ②诱导培养基αMEM+10%FBS+1%PS

实验步骤：

①使用完全培养基培养Raw264.7至汇合度达到80%，传代；

②使用不含RANKL的诱导培养基铺板，接种密度为1~2.5×10⁴ cells/mL；

③细胞适应12h后，添加含有不同浓度RANKL的诱导培养基；

④每48h更换含有不同浓度RANKL的诱导培养基；

⑤观察细胞状态，诱导72-96h后，可形成成熟的破骨细胞（破骨细胞在成熟后24h内死亡，诱导之后需每天观察分化情况)。

下图为Day6，不同浓度RANKL诱导下，Raw264.7形成破骨细胞的情况，RANKL添加浓度为13.7ng/mL-10000ng/mL时，可成功诱导破骨细胞：

注：RAW264.7细胞表达M-CSF及其受体c-fms。因此，仅加入RANKL就足以诱导破骨细胞分化，无需额外加入M-CSF。